ACROBiosystems – Mabsol® biotinylated protein collection
Mabsol® 生物素標識蛋白(biotynylated protein collection)
PrecisionAvi系列 UltraLys系列
生物素(biotin)與卵白素(avidin)/鏈親和素(streptavidin, SA)的結合具有高度特異性和穩定性，這使得它成為非常適用於蛋白質生物化學實驗的研究工具。然而，製造高品質的生物素標識蛋白目前仍是一個重大的挑戰。研究人員經常遇到的技術問題，包括不能充分標識、批次間高度的差異，和不可預知的性能表現。此外，選擇使用不同的生物素標識手法也可能顯著影響實驗最終結果。每一個目標蛋白質都有著自己獨特的生化特性，因此生物素化需要客製化的對應方案。
這些複雜的因素使得個人實驗室很難製造和使用生物素結合物，同時，很少有商業化的產品可供購買。為了打破這些困境，ACROBiosystems公司開發出了一系列獨家的預先標識且經實驗驗證的生物素標識重組蛋白。MABSOL®生物素標識蛋白包含上百種常見新藥研究對象和生物標識蛋白。以高品質的人源細胞表達的蛋白質為原料，製造出符合最佳的生物活性和檢測靈敏度的生物素化蛋白。並施以最嚴格的品質控制，以確保批次間的差異到最小程度。
Mabsol® 生物素標記蛋白(Mabsol® biotinylated protein collection)包括兩個獨特的產品系列，兩個系列都有嚴格監控其製造過程以確保品質。
●以AvitagTM technology製造的PrecisionAvi系列
●以本公司獨有的化學標識技術製造的UltraLys系列
產品說明
PrecisionAvi系列
本系列產品是以AvitagTM技術生產製造。將Avi標識，一條十五個胺基酸的多肽鏈，植入蛋白質表現載體中以標識在表現出來的重組蛋白上。在Avi標識上的lysine residue可被大腸桿菌的生物素酶BirA生物素化。
這項利用Avi標識上的lysine residue與BirA的標識技術，要比一般的結合式檢定技術要有諸多優點。由於生物素化的位置是Avi標示上的lysine residue，所以不會影響目標蛋白質原本的結合部位。此外，由於精確掌控蛋白質上的Avi標識位置，因此當目標蛋白質放置於有固定著卵白素(avidin)的平面時，可以將蛋白進行定向。
產品列表 （關於產品的其他情報資料，請下載產品的Excel列表檔案以做進一步的確認）
| PCSK9 | |
| PC9-H82E7 | Biotinylated Human PCSK9, Avi Tag (Avitag™) |
| PCY-H82E7 | Biotinylated Human PCSK9 (D374Y), Avi Tag (Avitag™) |
| PC9-M82E1 | Biotinylated Mouse PCSK9, Avi Tag (Avitag™) |
| PD1 | |
| PD1-M82F4 | Biotinylated Mouse PD-1 / PDCD1, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| PD1-H82F2 | Biotinylated Human PD-1 / PDCD1, His Tag & Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| PD1-H82E4 | Biotinylated Human PD-1 / PDCD1 (recommended for biopanning), Avi Tag (Avitag™) |
| PDL1 | |
| PD1-H82F3 | Biotinylated Human PD-L1 / B7-H1, His Tag & Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| PD1-M82F5 | Biotinylated Mouse PD-L1 / B7-H1, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| PD1-H82E5 | Biotinylated Human PD-L1 / B7-H1 (recommended for biopanning), Avi Tag (Avitag™) |
| PDL2 | |
| PD2-H82E8 | Biotinylated Human PD-L2 / B7-DC Protein (recommended for biopanning), Avi Tag (Avitag™) |
| PD2-H82F6 | Biotinylated Human PD-L2 / B7-DC, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| FcRn | |
| FCM-M82W6 | Biotinylated Mouse FcRn / FCGRT & B2M, Avi Tag (Avitag™) |
| FCM-H82W4 | Biotinylated Human FcRn / FCGRT & B2M, Avi Tag (Avitag™) |
| FCM-C82W5 | Biotinylated Cynomolgus / Rhesus macaque FcRn / FCGRT & B2M, Avi Tag (Avitag™) |
| FCM-R82W7 | Biotinylated Rat FcRn / FCGRT & B2M, Avi Tag (Avitag™) |
| EGFR | |
| EGR-H82E7 | Biotinylated Human EGF R, Avi Tag (Avitag™) |
| TNF-alpha | |
| TNA-H82E3 | Biotinylated Human TNF-alpha (HPLC-verified), Avi Tag (Avitag™) |
| TNA-M82E9 | Biotinylated Mouse TNF-alpha (HPLC-verified), Avi Tag (Avitag™) |
| CTLA-4 | |
| CT4-C82E5 | Biotinylated Cynomolgus CTLA-4, Avi Tag (Avitag™) |
| CT4-H82E4 | Biotinylated Human CTLA-4, Avi Tag (Avitag™) |
| CT4-H82F3 | Biotinylated Human CTLA-4, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| OX40 | |
| OX0-H82F7 | Biotinylated Human OX40, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| VEGF | |
| VE1-H82E7 | Biotinylated Human VEGF121, Avi Tag (Avitag™) |
| CD40 | |
| CD0-H82F2 | Biotinylated Human CD40 / TNFRSF5, His Tag & Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| CD47 | |
| CD7-H82F6 | Biotinylated Human CD47, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| IgG Fc | |
| IG1-H82E2 | Biotinylated Human IgG1 Fc, Avi Tag (Avitag™) |
| IGA-M8210 | Biotinylated Mouse IgG2a Fc, Avi Tag (Avitag™) |
| TIGIT | |
| TIT-H82F1 | Biotinylated Human TIGIT Protein, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| TIT-H82E5 | Biotinylated Human TIGIT Protein, Avi Tag (Avitag™) |
| VISTA | |
| B75-H82E1 | Biotinylated Human B7-H5 / Gi24 / VISTA, Avi Tag (Avitag™) |
| HVEM / TNFRSF14 | |
| HV4-H82F1 | Biotinylated Human HVEM / TNFRSF14, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| Fc gamma RI/CD64 | |
| CD4-M52E8 | Biotinylated Mouse Fc gamma RI / CD64, Avi Tag (Avitag™) |
| IGF-II | |
| IG2-H82F9 | Biotinylated Human IGF-II, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| EGF R (vIII) | |
| EGR-H82E0 | Biotinylated Human EGF R (vIII), Avi Tag (Avitag™) |
| Fc gamma RIIA/CD32a | |
| CDA-H82E7 | Biotinylated Human Fc gamma RIIA / CD32a (R131), Avi Tag (Avitag™) |
| CDA-H82E6 | Biotinylated Human Fc gamma RIIA / CD32a (H131), Avi Tag (Avitag™) |
| Fc gamma RIIB/CD32b | |
| CDB-H82E0 | Biotinylated Human Fc gamma RIIB / CD32b, Avi Tag (Avitag™) |
| CDB-M82E8 | Biotinylated Mouse Fc gamma RIIB / CD32b, Avi Tag (Avitag™) |
| Fc gamma RIIIA/CD16a | |
| CDA-H82E8 | Biotinylated Human Fc gamma RIIIA / CD16a (F158), Avi Tag (Avitag™) |
| CDA-H82E9 | Biotinylated Human Fc gamma RIIIA / CD16a (V158), Avi Tag (Avitag™) |
| Fc gamma RIIIB/CD16b | |
| CDB-H82E1 | Biotinylated Human Fc gamma RIIIB / CD16b, Avi Tag (Avitag™) |
下面列表為ACROBiosystems公司正在開發中的生物素化標識蛋白質。這些產品有接受預訂，若有興趣請聯絡Tokyo Future Style。
| 4-1BB | CD30 | CD33 | OX40 | CD40/TNFRSF5 | CD47 |
| CD80/B7-1 | FOLR1 | LDLR | SIRPA/CD172a | TIM3/HAVCR2/KIM3 | BACE |
| CD147 | CD4 | B7H4 | CD38 | cMet | CSF1R |
| EPCAM | ErbB3 | IL-5 | VEGFR2 | CD22/SIGLEC2 | INSR |
| CD86 | B7-H5 | TNFR1 | GCSFR | CEACAM1 | IL2R |
| IL6R | IL5R | CD319 | TRAILR1 | TRAILR2 | TRAILR4 |
| IL-10 | IL-1a | IL-4 | IL-6 | CRP/C-Reactive | VEGFR1 |
※ACROBiosystems也接受委託，製造尚未被生物素化的Avi標識蛋白。
UltraLys系列
本系列產品是以ACROBiosystems公司獨家的化學修飾技術來生產製造。可將蛋白質分鏈上的lysine residue或是蛋白質N端生物素化。
通常一個蛋白質分子被標識上數個生物素，能夠有效提升檢測的靈敏度。
產品列表
| PD1 | |
| PD1-M8259 | Biotinylated Mouse PD-1 / PDCD1, Fc Tag, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| CD19 | |
| CD9-H8259 | Biotinylated Human CD19, Fc Tag, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| Her2/ErbB2 | |
| HE2-H822R | Biotinylated Human Her2 / ErbB2, ultra sensitivity (primary amine labeling, long spacer) |
| Her3/ErbB3 | |
| ER3-H8223 | Biotinylated Human ErbB3 / Her3, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| VEGF165 | |
| VE5-H8210 | Biotinylated Human VEGF165, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| FcRn/FCGRT&B2M | |
| FCM-H8286 | Biotinylated Human FcRn / FCGRT & B2M, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| TNF-alpha | |
| TNA-H8211 | Biotinylated Human TNF-alpha, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| TNA-H821R | Biotinylated Human TNF-alpha, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling, long spacer) |
| B7-H4 | |
| B74-H8222 | Biotinylated Human B7-H4, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| Siglec-3/CD33 | |
| CD3-H8226 | Biotinylated Human Siglec-3 / CD33, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| FGF | |
| BFF-H8117 | Biotinylated Human FGF basic, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| 4-1BB/TNFRSF9 | |
| 41B-H8258 | Biotinylated Human 4-1BB / TNFRSF9, Fc Tag, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| CD3E&CD3D | |
| CDD-H82W0 | Biotinylated Human CD3E & CD3D, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| CD3 epsilon | |
| CDE-H8223 | Biotinylated Human CD3 epsilon, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| EphB4 | |
| EP4-H8229 | Biotinylated Human EphB4, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| EpCAM/TROP1 | |
| EPM-H8223 | Biotinylated Human EpCAM / TROP1, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| EPM-H8254 | Biotinylated Human EpCAM / TROP1, Fc Tag, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| GM-CSF | |
| GMF-H8214 | Biotinylated Human GM-CSF, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| GPA33 | |
| GP3-H8224 | Biotinylated Human GPA33, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| TFPI | |
| TFI-H8226 | Biotinylated Human TFPI, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| Protein L | |
| RPL-P814R | Biotinylated Recombinant Protein L, ultra sensitivity (primary amine labeling, long spacer) |
| IL-6 | |
| IL6-H8218 | Biotinylated Human IL-6, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| IL-1 alpha | |
| ILA-H8213 | Biotinylated Human IL-1 alpha / IL-1F1, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| Mesothelin | |
| MSN-H8223 | Biotinylated Human Mesothelin / MSLN (296-580), ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| MSN-H826x | Biotinylated Human Mesothelin / MSLN (296-580), Fc Tag, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| SCF/KITLG | |
| SCF-M8228 | Biotinylated Mouse SCF / KITLG, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| SOST/Sclerostin | |
| SOT-H8245 | Biotinylated Human SOST / Sclerostin, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| Transferrin R/CD71 | |
| TFR-H8243 | Biotinylated Human Transferrin R / CD71, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| CX3CL1 | |
| CX1-H8221 | Biotinylated Human CX3CL1, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
Mabsol® biotynylated protein collection的特徵
高品質人源蛋白質
包括生物素化蛋白質在內，ACROBiosystems的蛋白質產品皆有使用其獨家的HEKMax®表現平台生產製造。作為表現蛋白質的來源，人源HEK293細胞要比其他用來表現蛋白的細胞有諸多優勢(參考下表)。最重要的是，HEK293細胞有保持人源蛋白表現過程中，轉譯後的修飾行為，能夠確保蛋白質產品的活性與安定性。
| Expression Systems | Folding | Phosphorylation | Proteolytic Processing | Glycosylation |
| E.Coli | + | N/A | N/A | N/A |
| Insect Cell | ++ | ++ | + | Poor |
| Plant Cell | +++ | ++ | ++ | Poor |
| CHO Cell | ++++ | +++ | +++ | Non-Human Like |
| Human Cell | +++++ | +++++ | +++++ | Human Authentic |
高生物活性與檢測靈敏度
生物素標識蛋白的生物活性，取決於蛋白自身結構和生物素標識的方法。對於每一個蛋白產品，ACROBiosystems都測試了多種標識和生物素標識方法，以多種結合實驗進行產品評估，只選擇表現最好的蛋白來進行生產。下面圖1為產品評估實驗範例。
圖 1.功能性ELISA檢測不同形式的生物素標識的PD1和rhPD-L1的結合能力（Cat. No.PD1-H5258）
ACROBiosystems公司的生物素標識蛋白在不同的應用中均具有高生物活性和極好的檢測靈敏度。如下面圖2顯示，固定在SA檢測晶片上的生物素(biotin)化Human FcRn / FCGRT & B2M(Cat.# FCM-H82W4)可以結合抗癌藥物賀癌平(HERCEPTIN)顯示其反應數據。(親合指數:2.24，SPR驗證)。圖3顯示，生物素化VEGF165 (Cat# VE5-H8210)可以在functional ELISA檢測中跟固定住的rhVEGFR2結合做比較。（EC50： 0.5-5 ng/mL）。
圖2、固定在SA檢測晶片上的生物素(biotin)化Human FcRn / FCGRT & B2M, Avi Tag (Avitag™) (Cat.# FCM-H82W4)可以結合抗癌藥物賀癌平(HERCEPTIN)。
圖3、biotinylated VEGF165 (Cat# VE5-H8210) 可以在ELISA檢測實驗中跟immobilized rhVEGFR2結合顯示反應結果
產品批次間的高一致性
ACROBiosystems公司以嚴格的檢查程序，確保產品的高品質與批次間的一致性。對新開發出來的產品，會在內部以嚴密的盲測模式進行各種測試實驗。只有通過測試的產品才能出廠販售。圖4表示兩個不同批次的EGFR-biotin的ELISA檢驗結果，其解離常數KD值非常相近（KD=104 nM跟109 nM），必須靠精密的檢測才能區分兩著的不同。
圖4、EGFR-biotin (Cat# EGR-H82E7)的兩個不同批次產品對EGF結合比較實驗
此外、還有對這兩個批次的產品以Centuximab進行ELISA檢測分析（0.2µg/well Centuximab）。
圖5、針對兩個不同批次EGFR-biotin (Cat# EGR-H82E7)的ELISA檢測分析
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